डीएनए निकालने के दौरान आइसोप्रोपैनोल का उपयोग क्यों किया जाता है
डीएनए निकालने के दौरान आइसोप्रोपैनोल का उपयोग क्यों किया जाता है?
Dna निष्कर्षण की प्रक्रिया में, isopropanol (isopropanol) आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले अभिकारकों में से एक है, जिसका उपयोग आमतौर पर dna अवक्षेप चरण में किया जाता है। यह सवाल कि डीना निष्कर्षण में आइसोप्रोपेन का उपयोग क्यों किया जाता है, इसमें रासायनिक प्रतिक्रिया सिद्धांत, संचालन में आसानी और प्रयोगों में इसकी अनूठी भूमिका है। यह पेपर Dna निष्कर्षण की प्रक्रिया में आइसोप्रोपैनोल की महत्वपूर्ण भूमिका का विस्तार से विश्लेषण करेगा।
1. आइसोप्रोपैनॉल डाना वर्षा में मदद करता है
Dna निष्कर्षण की प्रक्रिया में, निष्कर्षण समाधान में आमतौर पर सेल झिल्ली, न्यूक्लिक एसिड और अन्य सेलुलर घटकों को भंग करने के लिए एक बफर होता है। Dna स्वयं पानी या नमक समाधान में भंग हो जाता है, और मिश्रण से dna को अलग करने के लिए, इसे कुछ रसायनों का उपयोग करके वाष्पित किया जाना चाहिए। आइसोप्रोपैनोल आम अवक्षेप एजेंटों में से एक है।
आइसोप्रोपैनोल कम ध्रुवीय है और पानी की तुलना में, समाधान में जलयोजन प्रभाव को प्रभावी रूप से कम कर सकता है, जिससे dna अणुओं को एक अवक्षेप बनाने के लिए एक साथ इकट्ठा होने की अनुमति मिलती है। इस प्रक्रिया में, समाधान में लवण (जैसे सोडियम क्लोराइड) आइसोप्रोपेनॉल के साथ मिलकर काम करते हैं ताकि बाद की वसूली और विश्लेषण के लिए घोल से प्रभावी रूप से डीएनए को अलग किया जा सके।
2. आइसोप्रोल अल्कोहल को संभालना आसान है और इसमें कम अस्थिरता है
आइसोप्रोपैनोल में dna निष्कर्षण में उच्च आसानी होती है। एथेनॉल जैसे अन्य अवक्षेपों की तुलना में, आइसोप्रोल अल्कोहल में कम अस्थिरता होती है, जिसका अर्थ है कि यह कमरे के तापमान पर तेजी से वाष्पित नहीं करता है और संचालन में अधिक स्थिर है। आइसोप्रोल अल्कोहल की एकाग्रता आमतौर पर 70% और 100 के बीच होती है, जो इसे dna अवक्षेप की प्रक्रिया में स्थिर बनाता है और जब इथेनॉल समाधान की एकाग्रता बहुत अधिक या बहुत कम हो, तब अपूर्ण वर्षा की समस्या से बचा जाता है।
आइसोप्रोपैनोल की आणविक संरचना पानी के साथ इसके घुलनशील अंतर को काफी बनाती है, जो डाना वर्षा की दक्षता को बढ़ाता है। इसलिए, dna निष्कर्षण के लिए आइसोप्रोपेन का उपयोग करते समय, वर्षा प्रभाव बेहतर है, ऑपरेशन अधिक कुशल है, और प्रयोगात्मक प्रक्रिया में त्रुटि कम हो जाती है।
3. आइसोप्रोपैनोल इंजेक्शन को गिरावट से बचा सकता है
डीएनए निष्कर्षण की प्रक्रिया में, समाधान में dna अणुओं की स्थिति नाजुक और एंजाइमेटिक क्षरण (जैसे कि dnase) के लिए अतिसंवेदनशील है। आइसोप्रोपैनोल के अलावा बाहरी वातावरण में dna अणुओं के जोखिम समय को प्रभावी रूप से कम कर सकता है, इस प्रकार dnase और अन्य अपमानजनक एंजाइमों की गतिविधि को कम करना और डाना अणुओं को क्षतिग्रस्त होने से बचाना।
आइसोप्रोपैनोल के अलावा समाधान में पानी की गतिविधि को भी कम कर सकता है और समाधान में हाइड्रोलिसिस प्रतिक्रिया की दर को कम कर सकता है, जिससे dna के क्षरण से बचा जा सकता है। यह एक महत्वपूर्ण कारण है कि आइसोप्रोपेनोल को कई डाना निष्कर्षण प्रयोगों में अवक्षेप एजेंट के रूप में चुना जाता है।
4. आइसोप्रोपैनोल और अन्य अभिकर्मक तालमेल
डाना निष्कर्षण की प्रक्रिया में, आइसोप्रोपैनोल को अक्सर नमक (सोडियम क्लोराइड, पोटेशियम क्लोराइड, आदि) और आदर्श वर्षा की स्थिति बनाने के लिए बफर के साथ संयुक्त किया जाता है। लवण डीएनए अणुओं की सतह पर नकारात्मक शुल्क को बेअसर कर सकता है और डीएनए अणुओं के बीच पारस्परिक आकर्षण को बढ़ा सकता है। दूसरी ओर, आइसोप्रोपैनोल, समाधान की ध्रुवीयता को कम करके dna के एकत्रीकरण और वर्षा को बढ़ावा देता है।
यह तालमेल जटिल सेल मिश्रण से dna के कुशल पृथक्करण को सुनिश्चित करता है, जिसके परिणामस्वरूप उच्च गुणवत्ता वाले dna नमूने होते हैं। यह आइसोप्रोपैनोल को डीएनए निष्कर्षण का एक अभिन्न अंग बनाता है।
निष्कर्ष
डीएनए निष्कर्षण में आइसोप्रोपेनोल का उपयोग क्यों किया जाता है? आयोडीन निष्कर्षण में आइसोप्रोपेनॉल के कई फायदे हैं। यह न केवल dna की वर्षा में मदद करता है, बल्कि संभालने में भी आसान है, डीएनए को गिरावट से प्रभावी रूप से क्षरण से रक्षा कर सकता है, और डीएनए निष्कर्षण की दक्षता और शुद्धता सुनिश्चित करने के लिए अन्य अभिकर्मकों के साथ तालमेल से काम करता है। इसलिए, dna निष्कर्षण प्रक्रिया में एक अनिवार्य कुंजी एजेंट बन गया है।