आइसोप्रोल शराब कैसे सेवन करें? अपने सिद्धांत और अनुप्रयोग की व्याख्या करें

डीएनए निष्कर्षण और शुद्धिकरण आणविक जीवविज्ञान प्रयोगों में एक महत्वपूर्ण कदम है। आइसोप्रोल अल्कोहल (आइसोप्रोल अल्कोहल), एक आम अवक्षेप के रूप में, का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, का निष्कर्षण की प्रक्रिया में उपयोग किया जाता है। आइसोप्रोपेनोल डीना कैसे करता है? यह वैज्ञानिकों को डीएनए निकालने और शुद्ध करने में कैसे मदद करता है? यह लेख इस प्रक्रिया के सिद्धांत का गहराई से विश्लेषण करेगा और dna निष्कर्षण में इसके आवेदन पर चर्चा करेगा।

1. dna अवक्षेप मूल सिद्धांत

Dna अवक्षेप एक प्रक्रिया को संदर्भित करता है जिसमें dna विशिष्ट परिस्थितियों में समाधान के वातावरण को बदलकर ठोस कण बनाने के लिए एक समाधान से अवरूपण किया जाता है। आमतौर पर उपयोग की जाने वाली वर्षा एथेनॉल, आइसोप्रोपेनोल आदि होते हैं, जैसे कि आइसोप्रोपेनोल का उपयोग अक्सर एक वर्षा के रूप में किया जाता है, और इसकी भूमिका निम्नलिखित सिद्धांतों पर आधारित होती हैः

• समाधान की ध्रुवीयता को कम करेंः dna अणु खुद को नकारात्मक रूप से चार्ज किया जाता है, और जलीय समाधान में, पानी के अणु हाइड्रोजन बांडों के माध्यम से डीएनए अणुओं के साथ बातचीत करते हैं। आइसोप्रोपेन के अतिरिक्त होने के बाद, यह समाधान की ध्रुवीयता को कम करता है और डाना अणुओं और विलायक के बीच बातचीत को कमजोर करता है, जिससे dna अणुओं को अब भंग नहीं कर सकता है, जिससे एक अवक्षेप हो जाता है।

• नमी को दूर करना: आइसोप्रोपैनॉल जलीय घोल में पानी के अणुओं के साथ बातचीत करता है, नमी की मात्रा को कम करता है, डाना अणुओं के बीच इलेक्ट्रोस्टैटिक प्रतिकर्षण को कमजोर करता है, और डाना अणुओं को कुल और वर्षा के लिए प्रेरित करता है।

2. डीएनए प्रयोगात्मक चरणों की आइसोप्रोपेनोल वर्षा

Dna निष्कर्षण में, आइसोप्रोपेलेट डेना के विशिष्ट चरण आमतौर पर इस प्रकार हैंः

1. सेल लाइसिस: डीएनए सेल या यांत्रिक तरीकों के माध्यम से कोशिकाओं को तोड़ने के द्वारा जारी किया जाता है।

2. अशुद्धियों को हटानाः इंट्रासेल्यूलर प्रोटीन और अन्य अशुद्धियों को हटाने के लिए लवण, फेनोल्स और अन्य तरीकों का उपयोग, मुक्त dna छोड़ दें।

3. आइसोप्रोपैनोल जोड़नाः एक समान मात्रा में आइसोप्रोपैनॉल जोड़ें और धीरे से मिश्रण करें। चूंकि आइसोप्रोपैनॉल समाधान की ध्रुवीयता को कम करता है, इसलिए dna अणु समाधान से बाहर निकलने लगते हैं।

4. केन्द्रापसारता द्वारा डाना का संग्रहः अवक्षेप द्वारा ट्यूब के तल पर उपरलित किया गया था और सुपरनैंट को हटा दिया गया था।

5. धोने और विघटन: अवशोधित डाना को अशुद्धियों को दूर करने के लिए 70% आइसोप्रोपनोल से धोया जाता है, और शुद्ध dna अंततः एक उपयुक्त बफर या पानी के साथ भंग कर दिया जाता है।

इस प्रक्रिया के माध्यम से, डीएनए को एक शुद्ध दाना नमूना प्राप्त करने के लिए जटिल जैविक नमूनों से अलग किया जा सकता है।

3. dna वर्षा लाभ और चुनौतियों में आइसोप्रोपनोल

लाभ

• Dna की कुशल वर्षा: dna के अवक्षेप में, आमतौर पर इथेनॉल की तुलना में अधिक पूर्ण dna अणु प्राप्त कर सकते हैं, आइसोप्रोपानोल वर्षा दक्षता अधिक होती है, डीएनए की वसूली दर भी बेहतर होती है।

• कम विषाक्तता: अन्य कार्बनिक सॉल्वैंट्स के साथ तुलना में, आइसोप्रोल अल्कोहल कम विषाक्त, उपयोग करने के लिए सुरक्षित और संभालने में आसान है।

• अनुप्रयोगों की विस्तृत श्रृंखलाः आइसोप्रोपेनोल वर्षा विधि विभिन्न प्रकार के जैविक नमूनों के लिए उपयुक्त है, जिसमें बैक्टीरिया, पौधे और पशु ऊतक शामिल हैं।

चुनौती

हालांकि आइसोप्रोपेनॉल वर्षा विधि के कई फायदे हैं, लेकिन कुछ चुनौतियां भी हैंः

• घुलनशीलता में भिन्नताः आइसोप्रोपेन के विभिन्न बैचों की शुद्धता भिन्न हो सकती है, इसलिए dna वर्षा प्रक्रिया के दौरान, यह प्रभावित हो सकता है, जिसके परिणामस्वरूप dna की असंगत वसूली होती है।

• वर्षा की खराई: यदि ऑपरेशन अनुचित है, तो dna अवक्षेप अन्य अशुद्धियों के साथ मिश्रित किया जा सकता है, जो बाद के प्रयोगात्मक परिणामों को प्रभावित करेगा। इसलिए, धोने का चरण बहुत महत्वपूर्ण है।

4. dna व्यावहारिक अनुप्रयोग की आइसोप्रोल अल्कोहल वर्षा

आइसोप्रोपैनोल के साथ dna वर्षा व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, विशेष रूप से आणविक क्लोनिंग, जीनोमिक्स अनुसंधान और फोरेंसिक चिकित्सा के क्षेत्र में। सामान्य अनुप्रयोगों में शामिल हैंः

• Dna निष्कर्षण: कोशिका या ऊतक के नमूनों से डाना निकालने पर, आइसोप्रोपेनोल वर्षा एक सरल और कुशल विधि प्रदान करता है।

• जीनोमिक विश्लेषणः जीनोमिक अनुसंधान का संचालन करते समय, उच्च गुणवत्ता वाले डीएनए नमूनों को निकालना आवश्यक है। आइसोप्रोपेनॉल के साथ वर्षा शुद्ध dna उत्पन्न करता है, जो बाद के विश्लेषण की सटीकता को सुनिश्चित करता है।

• Pcr और क्लोनिंग प्रयोगों: निकाले गए dna नमूनों का उपयोग पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (pcr) या जीन क्लोनिंग प्रयोगों के लिए किया जा सकता है। आइसोप्रोपेनोल वर्षा डाना की शुद्धता सुनिश्चित करता है और प्रयोगों की सफलता दर में सुधार करने में मदद करता है।

5. सारांश

आइसोप्रोपेनोल डीना कैसे करता है? यह मुख्य रूप से समाधान की ध्रुवीयता को कम करता है ताकि dna अणु अब भंग न हो जाए। आइसोप्रोपेनोल वर्षा विधि न केवल कुशल और सरल है, बल्कि इसमें अनुप्रयोगों की एक विस्तृत श्रृंखला भी है और व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। हालांकि उपयोग प्रक्रिया में कुछ चुनौतियां हैं, सही ऑपरेशन चरणों के माध्यम से, प्रयोगात्मक परिणामों की विश्वसनीयता सुनिश्चित करने के लिए Dna निष्कर्षण की सफलता दर को अधिकतम किया जा सकता है।