Mengapa Isopropanol digunakan untuk mengekstrak rna

Mengapa isopropanol digunakan untuk mengekstrak RNA?

Isopropanol (Isopropanol) adalah pelarut organik biasa yang digunakan secara meluas dalam eksperimen biologi, terutama dalam proses pengekstrakan RNA. Ramai orang mungkin tertanya-tanya, mengapa isopropanol digunakan untuk mengeluarkan RNA, bukan hanya pelarut lain? Artikel ini akan meneroka secara terperinci peranan dan kepentingan isopropanol dalam pengekstrakan RNA.

Hubungan antara sifat kimia isopropanol dan pengekstrakan RNA

Isopropanol adalah pelarut dengan polariti yang lebih kecil, dan sifat kimianya memungkinkan untuk membantu RNA dengan berkesan daripada larutan selular. Dalam proses pengekstrakan RNA, fungsi utama isopropanol adalah mengurangkan kekutuban larutan, sehingga molekul RNA tidak lagi larut dengan air, sehingga membentuk curah hujan. Kelarutan molekul RNA dalam larutan berair lebih tinggi, sementara kelarutan dalam isopropanol menurun dengan ketara, yang memungkinkan RNA diasingkan dari sampel.

Mekanisme yang menggalakkan pemendakan RNA

Semasa mengekstrak RNA, penggunaan isopropanol dapat mengurangkan kekuatan ion larutan hingga tahap tertentu. Apabila isopropanol ditambahkan ke larutan lisis sel, ion terhidrat dikeluarkan, dan penghidratan asli pada permukaan molekul RNA menjadi lemah, yang menyebabkan molekul RNA berkumpul satu sama lain dan membentuk pemendakan. Proses pemendakan ini sangat penting untuk pemurnian RNA, kerana dapat menghilangkan protein, lipid dan kekotoran lain yang larut dalam fasa air dengan berkesan, sehingga memperoleh RNA yang lebih murni.

Volatil isopropanol dan kesan perlindungan pada RNA

Isopropanol mempunyai volatiliti yang rendah dan dapat menguap dengan cepat setelah digunakan, mengelakkan masalah degradasi RNA yang terdedah kepada air untuk waktu yang lama. Penyelesaian isopropanol dapat mengurangkan aktiviti enzim degradasi RNA (seperti enzim RNA) dan melindungi RNA dari persekitaran luaran. Ini sangat penting untuk menjaga integriti RNA yang diekstrak, terutama ketika melakukan aplikasi hilir, seperti analisis qPCR, blok Utara, dll.

Kelebihan isopropanol dalam pengekstrakan RNA

Berbanding dengan pelarut lain, seperti etanol, penggunaan isopropanol dapat meningkatkan kecekapan pengekstrakan RNA. Di bawah keadaan yang sama, isopropanol dapat mendakan RNA dengan lebih cepat, mengurangkan masa operasi dan meningkatkan hasil. Lebih-lebih lagi, penggunaan isopropanol dalam pengekstrakan RNA tidak menyebabkan pembubaran RNA yang berlebihan, jadi kesan pemendakan lebih ideal.

Ringkasan

Sebagai reagen utama dalam pengekstrakan RNA, isopropanol mempunyai sifat pelarut yang sangat baik, yang dapat meningkatkan pemendakan RNA dengan berkesan, meningkatkan kecekapan pengekstrakan, dan melindungi RNA dari degradasi. Dalam proses pengekstrakan RNA, isopropanol sangat diperlukan, memberikan sokongan teknikal penting untuk penyelidikan biologi dan eksperimen biologi molekul. Oleh itu, persoalan mengapa isopropanol digunakan untuk mengekstrak RNA, jawapannya terletak pada sifat kimianya yang unik dan kesan pelindungnya pada RNA, menjadikannya pelarut yang sangat diperlukan dalam proses pengekstrakan RNA.