Mengapa Isopropanol digunakan dalam pemisahan rna
Mengapa Isopropanol digunakan apabila mengasingkan RNA?
Semasa pengekstrakan RNA, isopropanol (isopropanol) digunakan secara meluas dalam pemisahan dan pemurnian RNA. Sebagai pelarut organik yang biasa, isopropanol memainkan peranan penting dalam pengekstrakan RNA. Ia bukan sahaja membantu menyelesaikan RNA, tetapi juga membantu menghilangkan kekotoran. Artikel ini akan menganalisis secara terperinci mengapa isopropanol digunakan dalam pemisahan RNA untuk membantu anda memahami peranan utamanya dalam pengekstrakan RNA.
Peranan isopropanol dalam pemendakan RNA
Proses pengekstrakan RNA melibatkan pemisahan RNA dengan kemurnian tinggi dari sel atau tisu. Peranan utama isopropanol dalam proses ini adalah untuk mempromosikan pemendakan RNA. Apabila sampel RNA dicampurkan dengan isopropanol, isopropanol akan bertindak balas dengan air, mengurangkan kekutuban larutan, sehingga RNA dapat diendapkan dari larutan. Ini kerana RNA membentuk pemendakan yang tidak larut dalam kepekatan garam yang tinggi dan pelarut polar yang rendah. Melalui sentrifugal, RNA akan menetap di bahagian bawah tiub untuk memudahkan pengumpulan dan pemurnian seterusnya.
Kesan penyingkiran kekotoran isopropanol
Semasa proses pengekstrakan RNA, sampel mungkin mengandungi protein, DNA atau kekotoran molekul kecil yang lain. Isopropanol bukan sahaja membantu pemendakan RNA, tetapi juga berkesan menghilangkan beberapa kekotoran larut dalam air. Apabila isopropanol ditambahkan ke ekstrak RNA, banyak protein dan DNA dikeluarkan semasa proses pemendakan. Ini kerana kekotoran ini sukar dilarutkan dalam isopropanol dan dapat dipisahkan dari RNA. Oleh itu, penggunaan isopropanol membantu meningkatkan kesucian RNA, memastikan ketepatan eksperimen berikutnya.
Perbandingan alkohol isopropanol dengan pelarut organik lain
Walaupun pelbagai pelarut organik boleh digunakan dalam pengekstrakan RNA, isopropanol adalah salah satu pilihan yang paling biasa digunakan kerana sifatnya yang unik. Berbanding dengan etanol, isopropanol lebih berkesan dalam pemendakan RNA, dan kelarutannya lebih rendah, yang dapat menghilangkan kelembapan dan kekotoran dengan lebih baik. Sebaliknya, pelarut lain seperti kloroform juga sering digunakan untuk pengekstrakan RNA, tetapi lebih beracun dan tidak selamat dan mudah dikendalikan seperti isopropanol. Oleh itu, penggunaan isopropanol dalam pengekstrakan RNA menjadi pilihan standard dalam industri.
Mengapa Isopropanol digunakan apabila mengasingkan RNA? Ringkasan
Sebab mengapa isopropanol digunakan semasa mengasingkan RNA adalah terutamanya kerana dapat mempromosikan pemendakan RNA dengan berkesan, menghilangkan kekotoran, dan meningkatkan kemurnian RNA. Ketoksikan dan keberkesanannya yang rendah menjadikannya reagen yang sangat diperlukan dalam proses pengekstrakan RNA. Memahami peranan isopropanol bukan sahaja dapat membantu kelancaran operasi eksperimen, tetapi juga membantu para penyelidik meningkatkan kebolehpercayaan dan pengulangan data semasa proses pengekstrakan RNA.