Почему изопропанол используется при извлечении ДНК

Зачем использовать изопропанол при извлечении ДНК?

Изопропанол является одним из обычно используемых реагентов в процессе экстракции ДНК и обычно используется на стадии осаждения ДНК. Зачем использовать изопропанол при извлечении ДНК? Эта проблема касается принципов химических реакций, простоты их работы и их уникальной роли в экспериментах. Важная роль изопропанола в процессе экстракции ДНК будет подробно проанализирована в этой статье.

1. Изопропанол способствует осаждению ДНК

В процессе экстракции ДНК экстракт обычно содержит буферы, которые растворяют клеточные мембраны, нуклеиновые кислоты и другие клеточные компоненты. Сама ДНК растворяется в воде или солевом растворе, и для того, чтобы отделить ДНК от смеси, необходимо использовать определенные химические вещества для ее осаждения. Изопропанол является одним из распространенных осадителей.

Изопропанол имеет более низкую полярность, и изопропанол может эффективно снижать эффект гидратации в растворе по сравнению с водой, позволяя молекулам ДНК собираться вместе с образованием осадка. Во время этого процесса соли в растворе (например, хлорид натрия) совместно с изопропанолом эффективно отделяют ДНК от раствора и облегчают последующее извлечение и анализ.

2. изопропанол прост в эксплуатации и имеет низкую летучесть

Изопропанол обладает высокой простотой в эксплуатации при экстракции ДНК. Изопропанол обладает более низкой летучестью по сравнению с другими осажденными агентами, такими как этанол, что означает, что он не испаряется быстро при нормальной температуре и является более стабильным при работе. Используемый изопропанол обычно находится в концентрации от 70% до 100%, что позволяет ему оказывать стабильное воздействие в процессе осаждения ДНК, избегая проблемы неполного осаждения, возникающего при слишком высокой или слишком низкой концентрации раствора этанола.

Молекулярная структура изопропанола значительно отличается от растворимости воды, что повышает эффективность выделения ДНК. Следовательно, при использовании изопропанола для извлечения ДНК эффект осаждения лучше, а операция более эффективна, что снижает погрешности в экспериментальном процессе.

3. Изопропанол может защитить ДНК от деградации

В процессе экстракции ДНК молекулы ДНК находятся в хрупком состоянии в растворе и подвержены деградации ферментов (таких как ДНКаза). Добавление изопропанола может эффективно уменьшить время, в течение которого молекулы ДНК подвергаются воздействию внешней среды, и вероятность контакта с водой, тем самым снижая активность ферментов, таких как ДНКаза, и защищая молекулы ДНК от разрушения.

Добавка изопропанола также может снизить активность влаги в растворе и снизить скорость реакции гидролиза в растворе, тем самым дополнительно предотвращая деградацию ДНК. Это также является одной из важных причин, по которой изопропанол был выбран в качестве осадителя во многих экспериментах по экстракции ДНК.

4. Синергия изопропанола с другими реагентами

В процессе экстракции ДНК изопропанол часто взаимодействует с другими реагентами, такими как соли (хлорид натрия, хлорид калия и т. Д.) И буферы, чтобы сформировать идеальные условия осаждения. Соли могут нейтрализовать отрицательные заряды на поверхности молекул ДНК, усиливая взаимное притяжение между молекулами ДНК. Изопропанол дополнительно способствует агрегации и осаждению ДНК за счет уменьшения полярности раствора.

Этот синергизм может обеспечить эффективное выделение ДНК из сложной смеси клеток и получение высококачественных образцов ДНК. Это делает изопропанол неотъемлемой частью экспериментов по извлечению ДНК.

Вырезание

Зачем использовать изопропанол при извлечении ДНК? Изопропанол имеет множество преимуществ при экстракции ДНК. Он не только способствует осаждению ДНК, но и прост в эксплуатации, эффективно защищает ДНК от деградации и работает в синергии с другими реагентами, обеспечивая эффективность и чистоту экстракции ДНК. Таким образом, изопропанол становится незаменимым ключевым реагентом в процессе экстракции ДНК.