Почему изопропанол используется для экстракции rna

Почему изопропанол используется для экстракции РНК?

Изопропанол является распространенным органическим растворителем и широко используется в биологических экспериментах, особенно в процессе экстракции РНК. Многим может быть любопытно, почему изопропанол используется для экстракции РНК, а не только других растворителей? Роль и важность изопропанола в экстракции РНК будут подробно рассмотрены в данной статье.

Связь между химическими свойствами изопропанола и экстракцией РНК

Изопропанол представляет собой менее полярный растворитель, химическая природа которого позволяет эффективно помогать РНК осаждаться из клеточного раствора. В процессе экстракции РНК основная роль изопропанола заключается в уменьшении полярности раствора, так что молекулы РНК больше не растворяются с водной фазой, образуя тем самым осадок. Молекулы РНК имеют более высокую растворимость в водном растворе и значительно уменьшенную растворимость в изопропаноле, что позволяет выделять РНК из образца.

Механизмы, способствующие осаждению РНК

При экстракции РНК использование изопропанола может в некоторой степени снизить ионную силу раствора. Когда изопропанол добавляется к раствору клеточного лиза, ионы гидратации удаляются, и первоначальная гидратация на поверхности молекул РНК ослабляется, что приводит к тому, что молекулы РНК собираются друг с другом и образуют осадок. Этот процесс осаждения имеет решающее значение для очистки РНК, поскольку он может эффективно удалять белки, липиды и другие примеси, растворенные в водной фазе, чтобы получить более чистую РНК.

Летучесть изопропанола и защитное действие на РНК

Изопропанол обладает низкой летучестью и может испаряться быстрее после использования, что позволяет избежать проблемы деградации РНК при длительном воздействии воды. Раствор изопропанола может снизить активность ферментов, разрушающих РНК, таких как РНК-ферменты, и защитить РНК от внешней среды. Это имеет решающее значение для сохранения целостности экстрагированной РНК, в частности, при выполнении последующих применений, таких как анализ qPCR, Northern blot и т. д.

Преимущества изопропанола в экстракции РНК

Использование изопропанола может повысить эффективность экстракции РНК по сравнению с другими растворителями, такими как этанол. При тех же условиях изопропанол способен быстрее осаждать РНК, сокращая время работы и повышая выход. Кроме того, применение изопропанола в экстракции РНК не приводит к чрезмерному растворению РНК, поэтому его эффект осаждения является более желательным.

Резюме

Как ключевой агент в экстракции РНК, изопропанол обладает превосходными свойствами растворителя, может эффективно способствовать осаждению РНК, повышать эффективность экстракции и защищать РНК от деградации. В процессе экстракции РНК роль изопропанола является незаменимой, обеспечивая важную техническую поддержку для биологических исследований и молекулярно-биологических экспериментов. Поэтому ответ на вопрос о том, почему изопропанол используется для экстракции РНК, заключается в его уникальных химических свойствах и его защитном действии на РНК, что делает его незаменимым растворителем в процессе экстракции РНК.